| 초록 |
유전체 정보 기반 형질관련 유전자 탐색을 위해 넙치 EST 및 게놈 정보 분석으로 근육 성장 등 관련 유전자 분리(38종) 및 구조 분석(3종), 편집대상 유전자 특성 및 발현 분석(5종), 유전자 운반체 제작(5종) 및 모델시스템을 이용해 유전자 기능을 연구하였고(2종), 미오스타틴 (myostatin, PoMSTN)-특이적 가이드RNA 제작 및in vitro 활성을 검증하여(2종) 기능성 유전자 발현 조절 기반을 구축함 넙치 수정란 최적화 미세주입 조건을 확립하였고 PoMSTN-가이드RNA에 의한 유전자편집을 분석하였고, 티로시네이즈(tyrosinase, Tyr)-가이드RNA의in vitro 활성 검증(2종) 및 미세주입 후 편집을 확인함으로써(30%) 유전자 발현 제어 기술을 확립함 넙치 수정란 in vivo 유전자 발현 분석 기술 개발을 위해 수정란 in situ hybridization (whole-mount, section)법 확립 및 분석(3종), in situ hybridization법과 Q-PCR법으로 발생 배, 부화 자어에서 발현 비교 분석(3종), 소규모 인공수정법(td-IVF) 개발에 의해 수정란 대량 미세주입을 실시함 유전자편집 어류 생산 및 분석을 위해 PoMSTN-가이드RNA 미세주입 개체의 암수 판별 및 생식세포 유전자편집 넙치를 확보하고 이를 교배하여 생산한 자손세대(F1, 240마리)를 대량 신속 판별법으로 분석하여 완전편집 개체 20마리를 확보하였음. 발생 배 또는 근육에서 PoMSTN 유전자의 발현 및 계측형질을 분석함으로 유전자편집 기술을 이용한 기능성 어류개발의 목적을 달성함 유전자편집 기술 효율 평가를 위해 미세주입 넙치 체세포 및 생식세포의 유전자편집율 분석, PoMSTN-유전자편집 넙치 F1 스크리닝 및 편집 효율 평가, PoMSTN-가이드RNA/PoTyr-가이드 RNA의 동시 미세주입 후 편집 효율을 분석함 넙치 세포주 개발 및 특성 분석을 위해 수정란 및 조직 일차세포배양으로 세포주 확립 및 계대배양(4종)하였고, 동정 마커 유전자 후보군을 선별(5종)하여 유전자 발현 분석(3종)을 실시함. 넙치 세포주 보존 및 활용 기술 개발을 위해 세포주(FGBC4) 동결보존, 해동 및 배양 최적 조건을 확립하였고 면역 자극에 의한 면역반응관련 유전자의 발현을 분석함으로써(9종) 세포주의 면역 반응성을 조사함 연구결과를 활용하여 SCI급(5편) 및 국내(3편) 논문을 발표하고 2건의 특허 및 1건의 실용신안을 출원하고 1건의 기술이전을 실시함으로써 수산업의 미래 산업화를 위한 해양수산분야 과학기술 발전에 기여하였고 현장기술 설명회, 전문지 기고 및 대국민 홍보를 실시함 (출처 : 요약 5p) |
